EdU與T非常相似，而EdU染料只有BrdU抗體的1/500，在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無(wú)需DNA變性（酸解、熱解、酶解等），可有效避免樣品損傷，而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復(fù)制的DNA分子中，通過(guò)基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比，EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒價(jià)格。福建哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司

EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度上海如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的重要性。

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試劑盒以外自備試劑和儀器：●PBS●純水●1%乙酸●移液器及吸頭●有515nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀使用方法：使用注意事項(xiàng)：●接種時(shí)注意細(xì)胞懸液一定要混勻，以避免細(xì)胞沉淀下來(lái)，導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不等，可以每接種幾個(gè)孔就混勻一下。培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)基容易揮發(fā)，為了減少誤差，建議培養(yǎng)板的四邊每孔只加培養(yǎng)基，而不作為指標(biāo)檢測(cè)孔?！衽囵B(yǎng)時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔內(nèi)細(xì)胞數(shù)量的多少而異。●用水或乙酸洗細(xì)胞時(shí)充滿孔后保持一會(huì)倒掉即可，也可以用排或洗板機(jī)?！馩D值在1-2之間較好。以96孔板為例：1．取出培養(yǎng)好待測(cè)的96孔板。2．在培養(yǎng)基表面小心加入50μl固定液(懸浮細(xì)胞加100μl固定液)，靜置5分鐘后放入4℃冰箱30分鐘-1小時(shí)。(貼壁細(xì)胞可棄培養(yǎng)基后加入用水3倍稀釋的固定液；懸浮細(xì)胞必須直接加入固定液，輕加在培養(yǎng)液面，靜置5分鐘后再將平板移至4℃放置1小時(shí)，可使懸浮細(xì)胞固定在培養(yǎng)孔底部)。dU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒找哪家比較安心？上海東寰不錯(cuò)。

BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測(cè)原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體，由于空間位阻，雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標(biāo)記的疊氮化物(Azide)，無(wú)需DNA變性，操作更便捷，兼容性好，檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測(cè)快速。相對(duì)于BrdU法，本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測(cè)新合成的DNA，所需時(shí)間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后，增殖的細(xì)胞呈棕色，可以用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖的效果圖。無(wú)EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列)；EdU(10μM)孵育2小時(shí)組有明顯的棕色染色(中間一列)；而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預(yù)處理0.5小時(shí)后，棕色染色減弱，說(shuō)明DNA合成被抑制后，EdU的摻入被抑制(右側(cè)一列)。有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒？湖北品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

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傳統(tǒng)的免疫熒光染色（BrdU）檢測(cè)方法需要DNA變性，抗原修復(fù)，抗原抗體過(guò)夜孵育，操作步驟復(fù)雜繁瑣。并且由于BrdU抗體分子較大，嵌入DNA分子中的BrdU無(wú)法直接與BrdU抗體結(jié)合，必須先進(jìn)行DNA變性操作才能使BrdU抗原表位暴露，但變性的程度可能導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果變性不充分，會(huì)導(dǎo)致BrdU難以暴露，無(wú)法檢測(cè)，而且變性過(guò)程從邊緣向中間滲透，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞核DNA的變性不均勻，邊緣模糊不清。如果變性過(guò)分，則會(huì)導(dǎo)致DNA斷裂，甚至降解，導(dǎo)致核染不均一。另外，不同抗體試劑公司的抗體質(zhì)量不一致，造成難以確保實(shí)驗(yàn)重復(fù)性，且容易產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。福建哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司

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